Последовательность работы на санном микротоме

Если Вам необходима помощь справочно-правового характера (у Вас сложный случай, и Вы не знаете как оформить документы, в МФЦ необоснованно требуют дополнительные бумаги и справки или вовсе отказывают), то мы предлагаем бесплатную юридическую консультацию:

  • Для жителей Москвы и МО - +7 (499) 110-86-37
  • Санкт-Петербург и Лен. область - +7 (812) 426-14-07 Доб. 366

Саркисова и Ю. ISBN Для получения гистологических срезов применяют специальные микротомные ножи , различающиеся по форме, длине и углу сечения лезвия. По форме они представляют собой сложный стальной клин, у которого режущий край имеет дополнительную клиновидную заточку. Длина ножа может составлять от 8 до 50 см.

Если крышка стола не имеет специального покрытия, то его следует сделать из какого либо влагоустойчивого материала.

Техника приготовления гистологических препаратов для световой микроскопии. Материал желательно получать как можно раньше после смерти людей метод исследования материала трупа человека — аутопсия.

Гистологическая техника

Саркисова и Ю. ISBN Для получения гистологических срезов применяют специальные микротомные ножи , различающиеся по форме, длине и углу сечения лезвия. По форме они представляют собой сложный стальной клин, у которого режущий край имеет дополнительную клиновидную заточку. Длина ножа может составлять от 8 до 50 см. По конфигурации лезвия различают три группы микротомных ножей: А, В и С. У микротомных ножей, относящихся к группе А , одна поверхность ровная, а другая вогнутая их называют плоско-вогнутыми с большой кривизной вогнутой поверхности.

Эти ножи чаще всего изготовлены из мягкой или относительно мягкой стали и предназначены для резки объектов, залитых в целлоидин. Ножи, относящиеся к группе В , называются плоско-вогнутыми , но кривизна вогнутой поверхности у них значительно меньше , чем у ножей группы А. Они изготовлены из более твердой стали, используют их для приготовления целлоидиновых и целлоидин-парафиновых срезов. У ножей, относящихся к группе С , обе поверхности клинка плоские.

Их изготавливают из твердой стали и применяют для резки объектов, залитых в парафин, а также для получения срезов на замораживающем микротоме. Кроме того, для приготовления парафиновых и полутонких срезов на микротомах и ультратомах используют металлические магнитные лезвия и стеклянные ножи.

Металлическое магнитное лезвие одноразовый нож позволяет получить срезы с парафиновых блоков, затем лезвие меняют. Получить качественные гистологические срезы при целлоидиновой, целлоидин-парафиновой и парафиновой заливке материала можно с помощью микротомного ножа, толщина лезвия которого должна быть от 3 до 5 мкм. Для работы на замораживающем микротоме необходимо иметь острый нож без зазубрин на лезвии.

Нож необходимо своевременно точить, а перед каждой резкой объектов править. Однако до сих пор не потеряла актуальности и применяется во многих лабораториях ручная заточка ножей. Вручную микротомные ножи точат на камне, имеющем форму бруска. Желты й, так называемый бельгийский камень используют для заточки первым, затем продолжают заточку на белом камне арканзасе , который имеет более мелкую зернистость.

Можно использовать природный аспидный камень, который также имеет крупнозернистую и мелкозернистую поверхность. На спинку ножа надевают специальный обушок желательно постоянно используемый для заточки одних и тех же ножей — это определяет угол заточки , а в стержень или отверстие в торцевой части ножа вкручивают ручку. Затем нож кладут обушком на камень, по которому скользит и лезвие под действием собственной тяжести.

Нож проводят по камню с одного конца на другой, а затем, поворачивая через обушок, осуществляют движение в обратном направлении. Продолжительность процесса зависит от квалификации лаборанта и состояния режущей кромки ножа.

В среднем она составляет от 30 мин до 1 ч. Периодически контролируют качество заточки, осторожно укладывая нож на предметный столик микроскопа и перемещая его так, чтобы режущая кромка проходила через поле зрения при малом увеличении. Затем нож правят на широком ремне, натянутом на деревянную колодку.

Правку проводят так же, как и заточку через обушок. Микротомы — это приборы, с помощью которых получают срезы тканей, залитых в различные среды, а также замороженных и нефиксированных. Микротомы позволяют получать гистологические срезы различной толщины. По принципу действия различают санные, ротационные, замораживающие микротомы , а также криостаты и вибратомы.

Санные микротомы характеризуются горизонтальным движением ножа и вертикальным подъемом блокодержателя. Их с успехом используют для резки объектов, залитых в целлоидин, целлоидин-парафин и парафин.

Основные части микротома располагаются на специальных салазках, отсюда происходит его название. Принцип работы санного микротома заключается в том, что при обратном ходе ножа ножевые салазки толкают стержень со шкалой регулятора подачи, вызывая его перемещение. Вращение храповика передается микровинту, который с помощью разъемной гайки перемещает салазки с блоком вверх. С каждым срезом блок поднимается все выше на расстояние, соответствующее толщине среза.

После того как блокодержатель достигнет высшей точки, с помощью разъемной гайки надо опустить салазки с механизмом в крайнее нижнее положение. Существуют другие разновидности санных микротомов с различными вариантами способов подачи, зажимов для ножей и т. Ротационные микротомы предназначены для резки парафиновых блоков, с их помощью можно получать серийные срезы.

Важнейшая часть ротационного микротома — механизм микроподачи, который включает в себя храповик, дифференциальный механизм, микровинт, лимб, косозубую передачу и кулачок. Винт перемещает каретку подачи объектодержателя. Толщина срезов устанавливается поворотом лимба. Объектодержатель ротационного микротома — винтовой зажим, вмонтированный в шаровую оправу каретки подачи.

Шарнирный механизм позволяет подать блок под любым углом. Объектодержатель фиксируется в зажиме специальной рукояткой.

Держатель для ножа — массивная подставка с двумя вертикальными стойками, в которые вмонтированы двигающиеся держатели, приспособленные для установки ножа под нужным углом. Фиксация ножа осуществляется винтами. В переднезаднем направлении нож перемещается по специальным направляющим с помощью винта. Постепенно приближая нож к объекту и одновременно поворачивая колесо подачи, подравнивают площадь резания, а затем нож фиксируют.

Ротационные микротомы снабжены специальной транспортной лентой, на которую с ножа попадает полоска серия срезов. На ленте их разделяют препаровальными иглами и производят дальнейшие манипуляции.

Снимать срезы с ножа ротационного микротома можно кисточкой или препаровальной иглой. Замораживающие микротомы используют для резки не залитых, но фиксированных объектов, материала, залитого в желатин и водорастворимые пластмассы.

Особенно широко применяются замораживающие микротомы для изготовления препаратов при исследовании материала срочных биопсий. По своей конструкции замораживающие микротомы относятся к микротомам санного типа, но в их устройстве есть некоторые особенности. Станина имеет приспособление для крепления к столу. Нож устанавливают под нужным углом в подвижной ручке с помощью одного или двух зажимов. Автоматическая подача осуществляется при каждом размахе ручки с ножом. Замораживающий столик снабжен приспособлением для подачи углекислоты или охлаждается термоэлектрически с помощью полупроводниковых элементов.

Криостаты, вибратомы. С развитием гистохимии ферментов и иммуноморфологии возникла необходимость в обработке нефиксированного материала, которая была реализована с помощью специальных приборов — криостатов. Позднее появились криокиты и вибратомы. Криостат — специализированная холодильная камера с установленным в ней микротомом, в которой имеются отверстия для рук, люминесцентная лампа и смотровое стекло.

Отрицательными моментами при работе с криостатом являются значительное переохлаждение рук оператора, недостаточная освещенность рабочего поля, а также невозможность ориентировать объект относительно кромки ножа.

Эти недостатки практически устранены в криокитах зарубежного производства, управление которыми вынесено за пределы морозильной камеры. В них можно отдельно регулировать температуру объекта и ножа. Уход за микротомами и микротомными ножами. Все скользящие поверхности микротомов должны быть чистыми и смазаны тонким слоем машинного или вазелинового масла.

При постоянной работе на микротоме все скользящие поверхности необходимо один раз в неделю протирать тряпочкой, смоченной бензином или толуолом, и смазывать. После окончания работы на микротоме объектодержатель и станину очищают от остатков парафина, предварительно вынув микротомный нож и убрав его в футляр.

Микротомные ножи никогда не оставляют в микротоме или на рабочем столе! Замораживающие микротомы и криостаты через 30 мин после выключения вытирают насухо и винтовую подачу смазывают вазелиновым маслом. Парафиновый блок, наклеенный на деревянную колодку или без нее с большим слоем парафина , зажимают в объектодержатель. Сначала выравнивают поверхность блока, установив микрометрическую шкалу на получение толстых мкм срезов, затем шкалу переводят на б -8 мкм и приступают к резанию материала.

Как правило, нож располагается перпендикулярно, но возможно также получение срезов особенно с более плотных объектов ножом, который установлен под углом к станине микротома.

Срезы с блока осторожно снимают с помощью сухой или смоченной в спирте кисточки, используют также изогнутую препаровальную иглу или скальпель. Срезы обычно переносят в коробку, дно которой выстлано бумагой черного цвета, и укладывают матовой стороной вверх. После получения нужного количества срезов рядом с ними кладут блок или этикетку с номером. Удобнее сразу обработать блоков, а затем приступить к монтированию срезов на предметные стекла. Часто срезы наклеивают на предметное стекло непосредственно с ножа.

Срезы приклеивают на предметное стекло блестящей, обращенной к ножу стороной. Небольшие складочки на срезе можно расправить, осторожно дотрагиваясь до них углом согнутой препаровальной иглы. Можно расправлять срезы непосредственно на стекле с помощью специального приспособления для сушки и расправления парафиновых срезов.

Для этого на предметное стекло пипеткой наносят каплю воды и в нее опускают срез. Стекло со срезом помещают на нагреваемый столик прибора, где срез постепенно расправляется. После удаления избытка воды пипеткой или фильтровальной бумагой стекло со срезом подсушивают и одновременно срез плотно фиксируется на предметном стекле. На нагреваемом столике прибора помещается одновременно 45 предметных стекол, при его использовании не требуется дальнейшего просушивания стекол со срезами в термостате.

Имеются специальные импортные ванночки для расправления срезов и переноса их на стекло. Однако при этом несколько затрудняется депарафинирование: требуется применение дополнительной порции ксилола и увеличение продолжительности депарафинирования. Существует сухой способ приклеивания срезов к стеклу, который пригоден только для срезов отличного качества. На предметное стекло, смазанное тонким слоем белка с глицерином, помещают срез, аккуратно расправляют его препаровальной иглой или скальпелем и слегка подогревают на спиртовке или нагреваемом столике.

Для приготовления целлоидиновых срезов используют ножи типа А и Б. Целлоидиновые блоки закрепляют так же, как и парафиновые. После установки ножа в микротом к нему пододвигают объектодержатель с укрепленным в нем блоком. Выравнивают поверхность блока до тех пор, пока полностью не обнажится ткань кусочка, а затем приступают к приготовлению срезов желаемой толщины. Нож по салазкам микротома ведут плавно, без давления.

Полученный срез расправляют на ноже с помощью кисточки, после чего срез снимают с ножа на подушечку указательного пальца, подложенного под нож.

Приготовление гистологических срезов

Микротом санный предназначен для получения срезов растительных и животных тканей, залитых в парафин или целлоидин. Микротом санный рис. Станина 5, отлитая из чугуна, имеет в верхней части паз с плоскими направляющими, по которым перемещается суппорт 14 с ножедержателем На передней поверхности расположены наклонные направляющие. Дорогие читатели!

Последовательность работы на санном микротоме

Микротом санный предназначен для получения срезов растительных и животных тканей, залитых в парафин или целлоидин. Микротом санный рис. Станина 5, отлитая из чугуна, имеет в верхней части паз с плоскими направляющими, по которым перемещается суппорт 14 с ножедержателем На передней поверхности расположены наклонные направляющие. В них перемещается механизм подъема объектодержателя.

Основные типы современных микротомов

Категория: Медицина. Похожие презентации:. Методы исследования в гистологии, цитологии и эмбриологии часть 1. Введение в курс гистологии. История науки. Методы исследования. Интерпретация результатов онкомаркеров, гистологического исследования биоптатов из матки, С-канала, шейки матки.

МИКРОТОМЫ И ПРИЕМЫ ПОЛУЧЕНИЯ СРЕЗОВ НА НИХ

Низкопрофильные Высокопрофильные Высота 8 мм Высота 14 мм мягкие Быстрее нагреваются, Труднее в обслуживании Иногда дешевле высокопрофильных жесткие Меньше нагреваются, Проще в обслуживании Иногда дороже низкопрофильных Не во всех типов микротомов имеются держатели для всех типов лезвий Необходима проба каждого типа лезвия и конкретной марки для определения предпочтения От партии к партии качество лезвий одной марки может отличаться Очень жесткий. Для заточки требуется оборудование, расходные материалы и время. Нужен опытный технолог, способный правильно заточить нож.

Срезы могут быть изготовлены толщиной мкм. Наиболее употребительными являются срезы толщиной мкм.

.

Техника приготовления гистологических препаратов

.

.

.

.

.

ВИДЕО ПО ТЕМЕ: Гистологическая лаборатория. Изготовление гистологического препарата
Понравилась статья? Поделиться с друзьями:
Комментариев: 4
  1. atarur

    Добрый день, подскажите пожалуйста, человек 1,5 года был на срочной службе, в армии, а ему за это время нащитали 10000 грн. элементов, хотя на призыве обещали, что нащитывать не будут.

  2. Авксентий

    Помогите ему Тарас!

  3. Станимир

    А по вопросу кредита, я полностью Вас поддерживаю. Банки существуют за счет кредита.

  4. Таисия

    Добрый вечер Тарас! Будучи совладельцем евробляхи как долго я смогу ездить на Украине без проблем?

Добавить комментарий

Отправляя комментарий, вы даете согласие на сбор и обработку персональных данных